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使用凝膠色譜儀時會碰到的一些故障問題
更新時間:2018-07-26   點擊次數:1921次
   使用凝膠色譜儀時會碰到的一些故障問題
  診狀可能的原因及解決方法
  (一)保留時間變化
  1.柱溫變化柱恒溫,必要時需配置恒溫箱
  2.等度與梯度間未能充分平衡至少用10倍柱體積的流動相平衡柱
  3.緩沖液容量不夠用》25mmol/L的緩沖液
  4.柱污染每天沖洗柱
  5.柱內條件變化穩定進樣條件,調節流動相
  6.柱快達到壽命采用保護柱
  (二)保留時間縮短
  1.流速增加檢查泵,重新設定流速
  2.樣品超載降低樣品量
  3.鍵合相流失流動相PH值保持在3"7.5檢查柱的方向
  4.流動相組成變化防止流動相蒸發或沉淀
  5.溫度增加柱恒溫
  (三)保留時間延長
  1.流速下降管路泄漏,更換泵密封圈,排除泵內氣泡
  2.硅膠柱上活性點變化用流動相改性劑,如加三乙胺,或采用堿至鈍化柱
  3.鍵合相流失同前(二)3
  4.流動相組成變化同前(二)4
  5.溫度降低同前(二)5
  (四)出現肩峰或分
  1.樣品體積過大用流動相配樣,總的樣品體積小于峰的15%
  2.樣品溶劑過強采用較弱的樣品溶劑
  3.柱塌陷或形成短路通道更換色譜柱,采用較弱腐蝕性條件
  4.柱內燒結不銹鋼失效更換燒結不銹鋼,加在線過濾器,過濾樣品
  5.進樣器損壞更換進樣器轉子
  (五)鬼峰
  1.進樣閥殘余峰每次用后用強溶劑清洗閥,改進閥和樣品的清洗
  2.樣品中未知物處理樣品
  3.柱未平衡重新平衡柱,用流動相作樣品溶劑(尤其是離子對色譜)
  4.三(TFA)氧化(肽譜)每天新配,用抗氧化劑
  5.水污染(反相)通過變化平衡時間檢查水質量,用HPLC級的水
  (六)基線噪聲
  1.氣泡(尖銳峰)流動相脫氣,加柱后背壓
  2.污染(隨機噪聲)清洗柱,凈化樣品,用HPLC級試劑
  3.檢測器燈連續噪聲更換氘燈
  4.電干擾(偶然噪聲)采用穩壓電源,檢查干擾的來源(如水浴等)
  5.檢測器中有氣泡流動相脫氣,加柱后背壓
  (七)峰拖尾
  1.柱超載降低樣品量,增加柱直徑采用較高容量的固定相
  2.峰干擾清潔樣品,調整流動相
  3.硅羥基作用加三乙胺,用堿致鈍化柱增加緩沖液或鹽的濃度降低流動相PH值,鈍化樣品
  4.同前(四)4同前(四)4
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