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賽默飛離心小課堂 |如何利用超速離心法純化外泌體
更新時(shí)間:2019-07-03   點(diǎn)擊次數(shù):3360次

細(xì)胞作為我們生命小的單位,我們有宏觀的溝通,他們自然也有微觀的溝通。而這細(xì)胞的“語言”,就是外泌體系統(tǒng)。

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外泌體系統(tǒng)的意義

簡單的來說,細(xì)胞通過分離自己的一部分膜,把自己“情話”(核酸,蛋白等)包裹成外泌體釋放出去,后融入到別的細(xì)胞里進(jìn)行溝通。對(duì)于我們?nèi)祟悂碚f,破解了外泌體系統(tǒng)等于破解了細(xì)胞溝通的密碼,對(duì)于我們生命科學(xué)發(fā)展意義非凡。

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用超速離心法純化外泌體

研究外泌體的步,那一定是得先把這些小家伙給抓住。雖外泌體分離市場上百花齊放。 但這些分離技術(shù)都在純度上不盡人意。得到純的外泌體,揭開他們背后的故事,超速離心技術(shù)是非常好的選擇。

那么,

如何選擇合適的離心機(jī)

進(jìn)行外泌體離心分離?

賽默飛世爾是科學(xué)服務(wù)領(lǐng)域的先鋒,旗下離心機(jī)產(chǎn)品一直以安全可靠與無微不至的便捷性著稱。

?Thermo Scientific Sorvall WX+系列超速離心機(jī)

的離心性能:大離心力達(dá)802,000 xg,滿足外泌體純化實(shí)驗(yàn)需要

多樣的轉(zhuǎn)頭選擇可離心從1.5 mL離心管到250 mL離心瓶的各式離心容器,滿足您實(shí)驗(yàn)室離心各種應(yīng)用的需要,盡顯無以倫比的便捷性。

·Auto-Lock轉(zhuǎn)頭自鎖,3秒即可更換轉(zhuǎn)頭實(shí)現(xiàn)一機(jī)多用;Auto-ID瞬時(shí)轉(zhuǎn)頭自動(dòng)識(shí)別

·第三方認(rèn)證Clickseal生物安全性密封技術(shù),防止氣溶膠產(chǎn)生,保護(hù)實(shí)驗(yàn)人員的安全

·疲勞的Fiberlite轉(zhuǎn)頭,重量輕,硬度大,耐腐蝕,提供15年質(zhì)保,終身無需減速使用

 
 

近日,麻省綜合醫(yī)院(MGH)的研究人員開發(fā)的一款新型微流體裝置。 該裝置可以利用微流控技術(shù)快速檢測血液中癌癥細(xì)胞來源的外泌體,以此作為癌癥診斷手段。

通訊作者Shannon Stott教授說,他們的設(shè)備能夠從在血液中數(shù)十億細(xì)胞外囊泡中挑選出腫瘤特異的細(xì)胞外囊泡。這將為未來癌癥診斷及監(jiān)控提供新的方法。[1]

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由此看來,外泌體的應(yīng)用可謂是越來越廣泛了。這一技術(shù)也符合了當(dāng)今醫(yī)療的熱點(diǎn)“液體活檢”思想, 應(yīng)用前景可謂十分的光明。關(guān)于液體活檢,它另一個(gè)簡單粗暴的名字叫“滴血驗(yàn)癌”。想了解“液體活檢”的看官可以繼續(xù)關(guān)注我們的微信公眾號(hào)。我們往后會(huì)有詳細(xì)敘述。

 

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那么,超速離心技術(shù)在外泌體研究中到底是如何運(yùn)用的呢?

用超速離心法純化外泌體

參考實(shí)驗(yàn)流程

1.先取細(xì)胞培養(yǎng)液上清或體液作為樣本,低速離心300 xg,10 min,分離出細(xì)胞;留上清 2000 x g離心,10 min,去除死細(xì)胞。

2.剩下上清繼續(xù)提高離心力到10000 xg,30 min,去除細(xì)胞碎片,處理好后的上清可準(zhǔn)備進(jìn)行超速離心步驟。以100,000 xg的離心力,離心70 min,得到粗制外泌體沉淀(含有少量雜蛋白)。

3.用PBS重懸外泌體沉淀,再次100,000 xg,離心70 min,即可得到純凈的外泌體。[2]

如何選擇合適的離心機(jī)進(jìn)行外泌體離心分離?

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的離心性能:大離心力達(dá)802,000 xg,滿足外泌體純化實(shí)驗(yàn)需要

多樣的轉(zhuǎn)頭選擇,可離心從1.5 mL離心管到250 mL離心瓶的各式離心容器,滿足您實(shí)驗(yàn)室離心各種應(yīng)用的需要,盡顯無以倫比的便捷性

Auto-Lock™ III 轉(zhuǎn)頭自鎖系統(tǒng),3秒即可更換轉(zhuǎn)頭實(shí)現(xiàn)一機(jī)多用;Auto-ID瞬時(shí)轉(zhuǎn)頭自動(dòng)識(shí)別

第三方認(rèn)證ClickSeal™生物安全性密封技術(shù), 防止氣溶膠產(chǎn)生保護(hù)實(shí)驗(yàn)人員的安全

疲勞的Fiberlite™轉(zhuǎn)頭,重量輕,硬度大,耐腐蝕,提供15年質(zhì)保,終身無需減速使用

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